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              封闭抗体产生不足是反复自然流产的原因之一

                           发表时间:2015-09-02

                          免疫排斥是同种异体器官及组织移植失败的主要原因;而胎儿胎盘单位则在母体内存活10个月之久,却免遭母体的免疫排斥。导致这种差异的原因十分复杂,可能与妊娠时母胎间特殊的内分泌免疫调节有关。大部分反复自然流产可能是因为这种内分泌调节紊乱的结局。

               

                    检测封闭抗体的方法有以下几种:

               

                    1.补体依赖性细胞毒试验

              本法首先由McIntyre等建议。基本原理是女方血清内存在封闭抗体与男方外周血淋巴细胞结合,并在补体介导下致细胞死亡。经台盼蓝或伊红染色,可在光学显微镜下或在倒置显微镜下评判结果。然而,本法实验者需要具备扎实的实验基本功,每次分析均须由同一名技术员完成,以保证本法的准确性。

               

                    2.EA玫瑰花环抑制试验

              EA玫瑰花环形成是检测人外周血B淋巴细胞表面Fc受体的传统方法。首先由Power等改进用来检测封闭抗体。先将女方血清与男方外周淋巴细胞共育,经洗涤后,加结合了相应抗体的指示红细胞共育。然后在光学显微镜下分析结果。若女方血清中存在封闭抗体,则影响指示红细胞与男方B淋巴细胞结合。然而,由于B淋巴细胞表面的受体与抗体Fc段的结合对实验的要求较为严格,培养条件及缓冲液稍有差异,将大大影响实验结果,必须引起注意。

               

                    3.混合淋巴细胞培养(MLC)封闭试验

              混合淋巴细胞培养是检验两个体MHC Ⅱ类抗原相容性的一种筛选方法。最早由日本学者Takeuchi改进用来检测封闭抗体。实验时,男方淋巴细胞先经丝裂霉素处理,让其失去免疫反应能力,但保持免疫刺激能力。然后分别在含有AB型血清及女方血清的培养条件下,与女方淋巴细胞混合培养6天,在培养结束前18小时,加3H-TdR。分别收获相应细胞,用γ计数器测量其CPM值。结果以含女方血清的CPM值/含AB型血清的CPM值,即以封闭指数(BI)表示。该法对实验条件要求较高,其中包括:无菌、定量。若实验条件掌握严格,则结果可靠。

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